在生物技術領域，常(chang)使用(yong)親(qin)(qin)和(he)色(se)譜(pu)(pu)法(fa)(fa)進行(xing)病毒、蛋白的(de)(de)純化。親(qin)(qin)和(he)色(se)譜(pu)(pu)法(fa)(fa)屬于(yu)吸附色(se)譜(pu)(pu)法(fa)(fa)的(de)(de)一種，目(mu)標(biao)物質有選擇地吸附于(yu)色(se)譜(pu)(pu)柱(zhu)填料的(de)(de)配體上，然后通過更(geng)改緩沖液達到分離、回收(shou)的(de)(de)目(mu)的(de)(de)。使用(yong)親(qin)(qin)和(he)色(se)譜(pu)(pu)法(fa)(fa)回收(shou)目(mu)標(biao)成分，可以比凝(ning)膠(jiao)過濾(lv)或離子(zi)交(jiao)換色(se)譜(pu)(pu)法(fa)(fa)的(de)(de)精度高出很多。
QuikSep Sulfate是(shi)一種特定的親和填料，適用于(yu)部分病(bing)毒(du)、病(bing)毒(du)樣顆粒以及某些特定的抗原和蛋白（見表2）的分離純化。
特點(dian)：
1.?????? 快速、簡單（一步純化(hua)）。
2.?????? 載量高。
3.?????? 易(yi)于放大。
表1：性能參數(shu)
介質(zhi) | QuikSep Sulfate |
基質 | 高剛性(xing)瓊脂糖 |
粒(li)徑范圍 | 45-165μm |
平均(jun)粒(li)徑 | 90μm |
溶菌(jun)酶載量 | ≥3mg/ml 介質 |
pH穩定(ding)性 | 5-12（長期） 5-12（短期） |
操作(zuo)壓力 | ≤0.3MPa |
流(liu)速 | （16mm× 300mm，0.1MPa）300cm/h |
貯存溶液 | 20%乙(yi)醇 |
貯(zhu)存(cun)溫(wen)度 | 4-30℃ |
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表2：QuikSep Sulfate適用(yong)性
Viruses | Viral/Microbial Agents |
Rabies Influenza ? Japanese ? Enchephalitis Feline ? Leukemia Feline ? Herpes Feline ? Calicivirus Respiratory ? Syncytial Virus Human ? Herpes Simplex Human ? Measles Human ? Parainfluenza | Herpes ? Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits Hepatitis ? B Surface Antigen Filamentous ? Hemagglutinin from B. pertussis Leucocytosis ? Promoting Factor Hemagglutinin |
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QuikSep Sulfate純化狂(kuang)犬病毒層析工藝
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1. 層(ceng)析柱
介(jie)質：QuikSep Sulfate； 規(gui)格：1ml 預裝(zhuang)柱(zhu)
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2. 樣品預處理
高倍(bei)濃縮后的樣品用(yong)平衡液稀釋 20 倍，上(shang)樣(yang)前(qian) 0.45um 過濾(lv)，0.45um 過濾。
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3. 緩沖(chong)液
A：10mM PB，pH 7.2； B：10mM PB，1M NaCl，pH 7.2。
備注：所有溶(rong)液需 0.45um 過濾。
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4. 純(chun)化過(guo)程
流速：1ml/min 或者 30cm/h；
平衡(heng)：溶液 A 平衡 10CV（CV 指柱體積(ji)，下同(tong)）；
上樣：上樣 30CV；
清洗：溶(rong)液 A 平(ping)衡 10CV；
洗脫：溶(rong)液 B 洗脫 10CV，收集洗脫液。
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5. 純化圖譜
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5. 檢測結果(guo)
體積 （ml） | 蛋白濃度 （ug/ml） | 抗原含(han)量 （IU/ml） | 蛋白(bai)去除率 （%） | 收率 （%） | 濃縮倍(bei)數(shu) | 純化倍(bei)數 | |
原液 | 30 | 615 | 1.51 | 94 | 75.4 | 11 | 13 |
流穿液 | 30 | 557 | 0.22 | ||||
洗脫液 | 2 | 531 | 17.08 |
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7. 結論
該懸浮培養狂(kuang)犬病(bing)毒(du)純化工(gong)藝(yi)中，病(bing)毒(du)與 QuikSep Sulfate進行吸附結合，洗(xi)脫(tuo)液中蛋白去除率(lv)≈94%，回收率(lv)≈75.4% 。
8. 訂購(gou)信息
產品 | 規格(ml) | 貨號 |
QuikSep Sulfate | 25 | HZ1010-1 |
QuikSep Sulfate | 100 | HZ1010-1 |
QuikSep Sulfate | 500 | HZ1010-1 |
QuikSep Sulfate | 1000 | HZ1010-1 |
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